ارزیابی آنتی بادی تولید شده علیه لیپو پلی ساکارید ویبریو کلرا به منظور تشخیص سریع وبا

هدف: ایران یکی از کانون های بومی وبا بوده و تشخیص سریع به ویژه در مواقع طغیان بیماری، اهمیت حیاتی دارد. استفاده از آنتی بادی علیه اجزای لیپو پلی ساکارید یکی از روش های مهم تشخیص باکتری است. هدف این مطالعه، استخراج و تخلیص لیپو پلی ساکارید ویبریو کلرا و ارزیابی آنتی بادی پلی کلونال تولید شده علیه آن به منظور تشخیص وبا است. مواد و روش ها: ویبریو کلرا تهیه و در محیط عصاره تریپتون کشت داده شد. لیپو پلی ساکارید به روش فنل داغ-آب، استخراج، تخلیص و دیالیز شد و میزان پروتئین، قند، خلوص، و فعالیت زیستی آن اندازه گیری شد. برای تولید آنتی بادی، ابتدا باکتری کشته شده همراه با ادجوانت کامل به خرگوش تزریق شد و سپس طی سه نوبت، لیپو پلی ساکارید همراه با ادجوانت ناقص فروند تزریق شد. پس از تزریق آخرین یادآور، خون گیری به عمل آمد و میزان آنتی بادی علیه پیکر سروتیپ های اینابا، اگاوا باکتری، علیه لیپو پلی ساکارید سروتیپ های اینابا و اگاوا و علیه چندین باکتری مشابه دیگر با روش الایزا تعیین شد. نتایج: میزان پروتئین در لیپو پلی ساکارید تخلیص شده در حد صفر، قند آن 5/0 میلی‏گرم/ میلی‏لیتر، تیتر فعالیت آن 1024 و دارای سه باند 2/5، 4 و 14/5 کیلودالتونی بود. آنتی بادی های تهیه شده در خرگوش، قادر به شناسایی باکتری سروتیپ اگاوا و اینابا و همچنین لیپو پلی ساکارید خالص بود. آنتی سرم علیه سروتیپ اگاوا و اینابا قادر به واکنش متقاطع علیه یکدیگر بودند اما با سایر گونه های ویبریو و نیز سایر باکتری ها واکنش نشان ندادند. تیتر آنتی بادی علیه لیپو پلی ساکارید برای سروتیپ اگاوا 1:32000 و برای سروتیپ اینابا 1:16000 بود. نتیجه گیری: با توجه به هزینه کم تولید و حساسیت بالا و نظر به اهمیت و لزوم تشخیص بیماری وبا در کشور، می توان از آنتی سرم تولید شده در این مطالعه به عنوان ابزار تشخیص اولیه در تشخیص وبا و افتراق سویه های 01 از غیر 01 در غالب آزمون های ایمنولوژی استفاده نمود.